此試劑盒是科研用途，不屬于醫(yī)療器械 血管緊張素 I (血漿腎素活性)檢測(cè)試劑盒
【產(chǎn)品名稱】 通用名稱：血管緊張素 I （血漿腎素活性）檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 英文名稱：Angiotensin I (PRA) ELISA
【產(chǎn)品規(guī)格】 96T
【預(yù)期用途】 該試劑盒可用于檢測(cè)PRA（血漿腎素活性），檢測(cè)方法是通過測(cè)量單位時(shí)間每體積里產(chǎn)生的血管緊張素-1（Ang-1）的質(zhì)量。（ng/ml.h）
【前言簡介】 測(cè)量PRA值對(duì)于臨床評(píng)估高血壓病人的身體狀況是非常有用的。尤其可用于診斷原發(fā)性醛固酮增多癥（占高血壓患者5-13%）并且?guī)椭委熀凸芾砥渌愋偷母哐獕夯颊?。相比與檢測(cè)腎素濃度，該檢測(cè)方法能更準(zhǔn)確的檢測(cè)原發(fā)性醛固酮增多癥。原因如下： PRA值是血管緊張素-1的生成率，它是通過腎素的酶促作用，由底物血管緊張素原轉(zhuǎn)變而來。這就在依賴腎素濃度的同時(shí)，也需要依賴血管緊張素原的濃度。而這在腎素濃度檢測(cè)中是被忽略掉的。 在低濃度的情況下，血漿腎素濃度測(cè)試的靈敏度得不到保證。而PRA分析卻可以通過延長生成步驟中的溫育時(shí)間來提高靈敏度。 當(dāng)抑制劑結(jié)合腎素活性位點(diǎn)時(shí)，PRA就會(huì)被抑制。而在有抑制劑的情況下，腎素卻依舊能被相應(yīng)的抗體所識(shí)別出來。因此腎素濃度并不總是和血漿腎素活性相關(guān)。
腎素將血管緊張素原轉(zhuǎn)化為血管緊張素-1，然后大部分1型在肺循環(huán)中被血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>2型。2型血管緊張素能夠通過一系列作用升高血壓：收縮小動(dòng)脈、促進(jìn)鈉的重吸收、刺激腎上腺皮質(zhì)分泌醛固酮。醛固酮同樣也會(huì)影響鈉的代謝并升高動(dòng)脈血壓。 由于血管緊張素-2在血液樣本中非常不穩(wěn)定，因此非常難以準(zhǔn)確地測(cè)量其在循環(huán) 系統(tǒng)中的濃度。但是醛固酮的濃度卻能用IBL公司生產(chǎn)的試劑盒輕松的檢測(cè)出來。
【檢測(cè)原理】 1.生成步驟 采集EDTA血液，分離出血漿。分離出的血漿應(yīng)該在室溫下立即用于檢測(cè)，如果不能，需冷凍保存。樣本在采集和未調(diào)節(jié)PH前的處理過程中，不能放在冰上或者在0-10℃間保存。這樣會(huì)導(dǎo)致測(cè)量出的結(jié)果偏高。實(shí)驗(yàn)開始前需加入蛋白酶抑制劑和生成緩沖液，這樣能夠防止血管緊張素-1在血漿中被降解。加入緩沖液后，樣本PH會(huì)在6.0左右。之后把樣本分成兩部分，一部分在0-4℃，另一部分在37℃下準(zhǔn)確溫育90分鐘或者更長時(shí)間，這個(gè)過程中血漿腎素會(huì)催化底物生成血管緊張素-1。把PH調(diào)整到6.5或者7.4。這一步驟非常關(guān)鍵，一旦酸化到PH3.3或者更低再調(diào)回中性就會(huì)造成腎素不可逆的活化；而如果PH大于8.0，那就會(huì)破壞掉腎素。該溫育的過程牽涉到了另一組蛋白酶抑制劑，它能在終止生成反應(yīng)的同時(shí)，防止血管緊張素-1被降解成小段的肽鏈。 2.測(cè)量步驟 該檢測(cè)使用競(jìng)爭法，有2個(gè)溫育步驟，總溫育時(shí)間不到2個(gè)小時(shí)。*次溫育時(shí)，未標(biāo)記的血管緊張素-1（樣本、標(biāo)準(zhǔn)品以及質(zhì)控品中的）與生物素化的血管緊張素-1競(jìng)爭抗體。鏈霉親和素標(biāo)記的辣根過氧化物酶連結(jié)到固化的生物素-血管緊張素-1上。洗板洗去未結(jié)合的材料。然后加入酶底物液反應(yīng)，反應(yīng)一段時(shí)間后加入終止液并測(cè)量吸光值。吸光值大小與樣本中血管緊張素-1濃度成反比。標(biāo)準(zhǔn)品的值可用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣本的值可直接在標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出。 【試劑盒組成成分】 生成緩沖液 | 1×5ml | 含緩沖液和無毒性的抗生素 |
| 現(xiàn)配 | 加0.5ml95%乙醇到瓶中，*溶解。使用后冷藏，不用時(shí)請(qǐng)勿開蓋（蛋白酶抑制劑） | 微孔板 | 2×12×8 | 2個(gè)96孔的微孔板，包被有抗血管緊張素-1抗體、包裝袋中含干燥劑 | 生物素化A-Ⅰ | 1×30ml | 緩沖液、蛋白酶抑制劑、生物素化血管緊張素-1、無汞防腐劑 | 親和素-HRP | 1×0.5ml | 蛋白緩沖液、親和素-HRP復(fù)合物、無汞防腐劑、檢測(cè)前用分析緩沖液1：100稀釋、8小時(shí)穩(wěn)定 | 標(biāo)準(zhǔn)品 | 8× | 含合成A-Ⅰ多肽、蛋白合成液、無汞防腐劑標(biāo)準(zhǔn)品A 2ml B-H 0.7ml 濃度0、0.2、0.5、1.4、4、10、25、60ng/ml （體積為近似值，實(shí)際體積請(qǐng)看瓶上標(biāo)簽） | 質(zhì)控品 | 2×0.7ml | 含血管緊張素-1、蛋白緩沖液、無汞防腐劑、具體濃度見瓶身標(biāo)簽 | 分析緩沖液 | 1×40ml | 蛋白緩沖液、無汞防腐劑 | 洗液濃縮液 | 2×50ml | 10倍濃縮、含緩沖液、非離子型洗滌劑、無汞防腐劑、使用前1:10稀釋 | TM底物液 | 1×32ml | 含四甲基聯(lián)苯胺、雙氧水、不含DMF、DMSO | 終止液 | 1×12ml | 含1M硫酸 |
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