TNF-α檢測(cè)試劑盒采用重組 Protein G包埋的96孔酶標(biāo)板以錨定多克隆抗體分子，試劑盒內(nèi)提供的HRP偶聯(lián)物直接與待測(cè)樣本內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合到酶標(biāo)板的抗體上。孵育并清洗后，結(jié)合到酶標(biāo)板上的HRP偶聯(lián)物數(shù)量可以很方便的通過HRP顯色底物等試劑在OD450nm處讀取。這樣OD450 nm的數(shù)值與樣本內(nèi)的含量呈負(fù)相關(guān)。
TNF-α檢測(cè)試劑盒影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的主要因素有哪些？
1）不*的洗滌會(huì)降低測(cè)定性，導(dǎo)致不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果。務(wù)必確保洗板機(jī)的正常工作，確保酶標(biāo)板各孔被充分洗滌卻不干燥。
2）不合理的移液操作會(huì)導(dǎo)致高CV值和不理想曲線。
3）在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的過程中，TNF-α檢測(cè)試劑盒不正確的移液方式會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的稀釋，從而使錯(cuò)誤的數(shù)值進(jìn)入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，或者產(chǎn)生非線性曲線。確保移液器正常工作。每個(gè)孔中的液體體積不等可能就是移液器失靈或者槍頭使用不當(dāng)所致。
4）TNF-α檢測(cè)試劑盒在測(cè)定不同板中的樣品時(shí)，每一個(gè)板都對(duì)應(yīng)一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。技術(shù)錯(cuò)誤或者不同的孵育情況，環(huán)境條件都會(huì)引起酶標(biāo)板之間產(chǎn)生不同結(jié)果。一條標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定的樣品值必需是在相同環(huán)境下產(chǎn)生的，否則就是無效值。
