干貨！酶聯(lián)診斷試劑的工作原理講解
酶聯(lián)診斷試劑在國內(nèi)有許多種叫法，如：ELISA 檢測試劑盒、 ELISA Kit 、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、 酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是 ELISA 檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。它是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
酶聯(lián)診斷試劑是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用較廣的技術(shù)，其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的酶聯(lián)診斷試劑檢測方法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。
酶聯(lián)診斷試劑的工作原理：
促卵泡素（FSH）是動物腦垂體分泌作用于卵巢卵泡生長、發(fā)育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素。由于是生物大分子，不能透過細(xì)胞膜，F(xiàn)SH必須與靶細(xì)胞膜上的促卵泡素受體（FSHR）結(jié)合，經(jīng)過受體介導(dǎo)將信息傳遞到靶細(xì)胞內(nèi)，才能發(fā)揮其生物學(xué)功能。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體，檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。酶聯(lián)診斷試劑顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
