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寵物獸醫(yī)ELISA檢測(cè)工作要注意這幾點(diǎn)
   寵物獸醫(yī)ELISA檢測(cè)工作要注意這幾點(diǎn)
  寵物獸醫(yī)ELISA檢測(cè)作為一種在獸醫(yī)診斷領(lǐng)域新興的檢測(cè)技術(shù),因其*的優(yōu)勢(shì)受到了越來(lái)越多的關(guān)注,也將會(huì)獸醫(yī)體外診斷技術(shù)發(fā)展的潮流。這種采用抗原-抗體結(jié)合原理建立的各種檢測(cè)方法在臨床上廣泛應(yīng)用,不僅用于檢測(cè)各種腫瘤標(biāo)記物、自身抗體,還可以用于檢測(cè)感染性疾病標(biāo)志物和激素等。
  目前,該診斷技術(shù)以其具有的靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡(jiǎn)便快速、可進(jìn)行定性、定量檢測(cè)等優(yōu)勢(shì),已廣泛應(yīng)用于感染性疾?。ò?xì)菌性感染、病毒性感染、寄生蟲(chóng)、真菌、人畜共患疾病等)、腫瘤等多個(gè)領(lǐng)域。其檢測(cè)結(jié)果對(duì)臨床醫(yī)療決策的貢獻(xiàn)度進(jìn)一步提升,檢驗(yàn)結(jié)果的重要性也達(dá)到*的高度。
  在獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中,寵物獸醫(yī)ELISA檢測(cè)工作的核心問(wèn)題就在于操作的精準(zhǔn)性,所以必須在血樣采取與處理、回溫、加樣、孵育、洗滌、顯色和保護(hù)工作中對(duì)其檢測(cè)的質(zhì)量進(jìn)行控制,才能更好地促進(jìn)這一工作的重要性彰顯。實(shí)驗(yàn)時(shí)需要注意的這些地方:
  (1)在血樣采取與處理過(guò)程中應(yīng)確保采樣輕柔,預(yù)防出現(xiàn)溶血的情況,這主要是由于紅細(xì)胞在溶解過(guò)程中所釋放的物質(zhì)中具有過(guò)氧化物酶活性的特點(diǎn),進(jìn)而對(duì)檢測(cè)結(jié)果帶來(lái)影響。而且標(biāo)本存儲(chǔ)的時(shí)間較長(zhǎng)就會(huì)導(dǎo)致LGG聚合為多聚體,進(jìn)而出現(xiàn)本底過(guò)深和假陽(yáng)性的出現(xiàn),所以需要及時(shí)對(duì)血清樣板進(jìn)行測(cè)定,并將其放在4℃的保溫箱中。若測(cè)定的時(shí)間超過(guò)3天,應(yīng)將其低溫冰存。
  (2)在回溫過(guò)程中應(yīng)盡可能地采取低溫,一般回溫溫度只要確保洗滌液的結(jié)晶在充分搖動(dòng)的情況下可以*溶解即可。
  (3)在加樣過(guò)程中,由于其涉及的環(huán)節(jié)較多,所以在采用微量加樣器時(shí),應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定的加入量,將其加入到板孔之中,而且在加樣過(guò)程中應(yīng)確保加入的樣品處于板孔的底部。這樣就能有效預(yù)防在孔壁上存在的樣品,預(yù)防樣品濺出的同時(shí)還要避免其出現(xiàn)氣泡。
 ?。?)在孵育過(guò)程中,由于其在寵物獸醫(yī)ELISA檢測(cè)中需要一定的時(shí)間,所以其在這一過(guò)程中始終處于恒溫狀態(tài),具體的做法就是在恒溫箱中放置ELISA板。同時(shí)還要利用封板條將反應(yīng)孔封住,嚴(yán)禁將反應(yīng)板疊放,這樣就能夠有效地預(yù)防其蒸發(fā),同時(shí)又能夠確保每個(gè)反應(yīng)板的溫度快速平衡,盡可能地確保溫育溫度與溫育時(shí)間的精準(zhǔn)性。
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